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1 校準曲線工作范圍確定
實驗室應(yīng)根據(jù)校準曲線的線性范圍和樣品預(yù)處后預(yù)計的濃度或含量范圍確定校準曲線工作范圍。
2 應(yīng)在校準曲線濃度范圍要求
校準曲線濃度范圍均勻布置6個或以上的校準標準點(包括空白或一個低濃度標準點)。不同濃度點的校準標準要單獨配制，不能通過稀釋同一母液獲得。由此得到的相關(guān)系數(shù)r應(yīng)不小于0.997。
3 校準標準每個濃度點測試次數(shù)
至少要重復(fù)測定2次，建議3次或更多，檢測順序隨機確定。
4 檢查校準曲線各濃度點的標準偏差與濃度的關(guān)系
若標準偏差為一常數(shù)，則為直線回歸;若偏差與各濃度點的濃度成線性相關(guān)，則為加權(quán)直線回歸。
5 校準和線性度的評估方法
校準和線性度的評估有多種方法，具體選擇哪種方法，視具體情況而定。
6 確定校準曲線是否穩(wěn)定
需要在不同時間，制作同一條曲線的重復(fù)性。
7 單點校正
當目標組分含量或濃度在工作曲線工作范圍內(nèi)時，可使用單點校正，但應(yīng)研究單點校正范圍。
8 對標準方法進行線性及校準驗證需要滿足的要求
a)在方法（非標或者標準方法）規(guī)定的工作范圍內(nèi)確定校準曲線的各個濃度點。濃度點個數(shù)應(yīng)滿足第2點的要求（曲線濃度點的要求），最低濃度校準點應(yīng)遠離檢出限位于定量限附近，中間點為目標分析物日常檢測平均濃度水平，最高校準點濃度為工作范圍的最高點或接近最高點;
b)如果實驗室經(jīng)過技術(shù)判斷，認為按照a)中的要求還不能實現(xiàn)驗證的目的，可參照第9點的要求，實施進一步的驗證。
9 對非標準方法線性及校準進行確認需要滿足的要求
a)實驗室用有證標準樣品，采用比較檢測法檢測樣品中目標組分含量時，應(yīng)研究線性度及其對檢測結(jié)果的影響;
b)線性度及其對檢測結(jié)果影響的研究內(nèi)容包括:線性范圍、工作范圍、校準函數(shù)擬合及檢驗、校準曲線核查、單點校正可行性及單點校正范圍研究;
c)如果不能確定目標組分含量與儀器信號的關(guān)系，可以按照GB/T22554《基于標準樣品的線性校準》給出的方法進行校準函數(shù)參數(shù)估計及檢驗;
d)在完成線性范圍、工作范圍、校準函數(shù)擬合及檢驗的基礎(chǔ)上獲得的校準直線還應(yīng)滿足第8點a)的要求;
e)如果一條校準曲線在最低濃度到最高濃度范圍內(nèi)不能滿足相關(guān)要求，可考慮分多段制作校準曲線。
10 對校準曲線每個點進行顯著性檢驗
校準曲線質(zhì)量檢驗，需要對校準曲線每個點的結(jié)果進行檢驗，只有經(jīng)過顯著性檢驗沒有顯著性差異的點的結(jié)果才能作為校準曲線的值。若出現(xiàn)有顯著性差異的點，應(yīng)檢查分析系統(tǒng)，進行原因分析，采取糾正措施消除影響因素后重新制作校準曲線。如果要求校準曲線通過0點，還應(yīng)進行是否通過0點的檢驗。
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